AAT Bioquest 4503 SMCC Plus™ *Enhanced water solubility, crosslinking efficiency and stability* 5mg 

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美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 4503 SMCC Plus™ *Enhanced water solubility, crosslinking efficiency and stability* 5mg，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：4503

產(chǎn)品名稱：SMCC Plus增強(qiáng)水溶性交聯(lián)效率和穩(wěn)定性

英文名稱：SMCC Plus™ *Enhanced water solubility, crosslinking efficiency and stability*

產(chǎn)品規(guī)格：5mg

 AAT SMCC Plus增強(qiáng)水溶性交聯(lián)效率和穩(wěn)定性

產(chǎn)品說明：

與SMCC和磺基SMCC相比，SMCC Plus具有更高的水溶性和交聯(lián)效率。

示例協(xié)議

一目了然

重要說明

儲存在<-15°C很重要，應(yīng)存放在陰涼，黑暗的地方。

自收到之日起12個(gè)月內(nèi)即可使用。注意：SMCC Plus™ 可溶于水和許多其他水性緩沖液，但穩(wěn)定性低于 DMSO 或 DMF。因此，不建議制作重復(fù)使用的緩沖儲備溶液。此外，其溶解度隨著鹽濃度的增加而降低。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

1. 為含胺蛋白制備偶聯(lián)緩沖液，蛋白-NH2（緩沖液A）：磷酸鹽緩沖鹽水（PBS，pH 7.2）或其他pH 7.2至8.0的無胺緩沖液可用于此目的。注意：在偶聯(lián)過程中避免使用含有伯胺（例如Tris或甘an酸）和巰基的緩沖液，因?yàn)樗鼈儠c預(yù)期的反應(yīng)競爭。如有必要，將樣品透析或脫鹽到適當(dāng)?shù)木彌_液（如PBS）中。

2. 為含巰基的蛋白質(zhì)Protein-SH（緩沖液B）制備偶聯(lián)緩沖液：pH為6.5-7.5的無巰基緩沖液可用于此目的。注意：在偶聯(lián)過程中避免使用含有巰基的緩沖液，因?yàn)樗鼈儠c預(yù)期的反應(yīng)競爭。如有必要，將樣品透析或脫鹽到適當(dāng)?shù)木彌_液（如PBS）中。注意：添加1-5 mM EDTA有助于螯合二價(jià)金屬，從而減少含巰基蛋白質(zhì)中的二硫化物形成。

3. 制備脫鹽柱，從過量的交聯(lián)劑和反應(yīng)副產(chǎn)物中分離出改性蛋白質(zhì)。

4. 制備含胺（蛋白質(zhì)-NH2）和其偶聯(lián)緩沖液A和B中的含巰基蛋白質(zhì)（Protein-SH）溶液。

5. 制備蛋白 #1-SMCC Plus 偶聯(lián)物：將適量的 SMCC Plus™™ 加入緩沖液 A 中的蛋白 #1 溶液中。蛋白質(zhì)-NH的濃度2確定所需的 SMCC Plus™ 的摩爾比。建議所需的 SMCC Plus™ 量如下，但最佳比例必須通過使用目標(biāo)蛋白通過實(shí)驗(yàn)確定：

l 1 mg/mL <蛋白質(zhì)樣品使用摩爾過量 40-80 倍。

l 1-4 mg/mL 的蛋白質(zhì)樣品使用摩爾過量 20 倍。

l 5-10 mg/mL 的蛋白質(zhì)樣品使用摩爾過量 5 至 10 倍。

6. 將上述反應(yīng)混合物在室溫下孵育30-60分鐘或在4°C下孵育2-4小時(shí)。注意： 為了在完成之前停止偶聯(lián)反應(yīng)，加入含有還原半胱an酸的緩沖液，其濃度是蛋白質(zhì)-SH的巰基的幾倍。注意：偶聯(lián)效率可以通過電泳分離和隨后的蛋白質(zhì)染色來估計(jì)。

7. 使用與共軛緩沖液A平衡的脫鹽柱去除多余的SMCC Plus™。

8. 混合并混合含巰基（蛋白質(zhì)-SH）和脫鹽含胺的蛋白質(zhì)（蛋白質(zhì)-NH2）-SMCC Plus™偶聯(lián)物的摩爾比對應(yīng)于最終偶聯(lián)物所需的摩爾比，并且與兩種蛋白質(zhì)上存在的巰基和活化胺的相對數(shù)量一致。注意：與馬來酰亞胺部分反應(yīng)的分子必須具有游離（還原）巰基。對于蛋白質(zhì)，在室溫下使用 5 mM TCEP 還原二硫鍵 30 分鐘，然后通過合適的脫鹽柱兩次。請注意，蛋白質(zhì)（例如抗體）可能因二硫鍵wan全還原而失活。IgG 中鉸鏈區(qū)二硫鍵的選擇性還原可以用 2-巰基乙胺•HCl （2-MEA） 完成。可以使用N-琥珀酰亞胺基S-乙酰硫代乙酸酯（SATA）或2-亞氨基硫醇烷•HCl（特勞特試劑）將巰基添加到分子中，其可修飾伯胺。

儲存條件

儲存在2°C至8°C。 有效期為自收到之日起一年。

注意：SMCC Plus™ 對濕氣敏感。商店干燥。打開前將小瓶平衡至室溫，以避免水分凝結(jié)。溶解所需量的試劑，并在水解發(fā)生前立即使用。丟棄任何未使用的復(fù)溶試劑。不要將試劑儲存在溶液中。

 AAT SMCC Plus增強(qiáng)水溶性交聯(lián)效率和穩(wěn)定性

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